臨床流式細胞檢驗學術

第1章 總論
第一節 概述
第二節 常用染色技術
一、細胞免疫熒光染色技術
二、核酸熒光染色技術
三、熒光微球捕獲染色技術
第三節 基本檢驗流程
一、標本的采集、運送與儲存
二、標本處理
三、開機
四、儀器光路與流路的檢查與校准
五、上機測定
六、結果分析
七、檢驗報告
八、儀器清洗
九、關機
第四節 方法學特點
一、單細胞分析
二、定量分析
三、快速性
四、准確性
五、特異性
六、重復性
七、多參數分析
第2章 臨床型流式細胞儀
第一節 結構特點與工作原理
一、結構特點
二、工作原理
第二節 技術指標
一、熒光測量靈敏度
二、分辨率
三、前向散射光檢測靈敏度
四、分析速度
第三節 技術特色
一、門與設門
二、圖像數據資料顯示
三、FS閾值設定
四、補償設置
第四節 使用方法與技巧
一、開機程序
二、光路和流路的檢測程序
三、清洗程序
四、關機程序
五、檢驗方案的編輯
六、新編輯檢驗方案參數的調試
第五節 常見故障排除與維護
一、常見故障排除
二、儀器的維護常識
第六節 流式細胞儀工作術語
第3章 常見影響因素
一、溫度
二、pH
三、熒光染料濃度
四、雜質
五、細胞固定劑
六、溶液黏度
七、其他因素
第4章 標本的采集、運送與保存
第一節 標本采集
一、免疫功能分析類標本
二、血小板分析類標本
三、白血病細胞免疫分型類標本
四、DNA分析類標本
五、其他流式檢驗項目標本
第二節 標本運送
一、運送方法
二、注意事項
第三節 標本保存
一、短期保存
二、長期保存
第5章 單細胞懸液的制備
第6章 機體造血功能監測
第7章 機體免疫功能監測
第8章 機體凝血功能監測
第9章 自身免疫性疾病的鑒別診斷
第10章 腫瘤臨床中的應用
第11章 白血病免疫診斷與分型
第12章 強直性脊柱炎的鑒別診斷
第13章 陣發性睡眠性血紅蛋白尿的鑒別診斷
第14章 細胞因子測定
第15章 質量控制
附錄A Multicycle DNA含量與細胞周期分析軟件
附錄B 臨床常見流式檢驗指標的正常參考范圍
附錄C 臨床流式細胞學檢驗技術相關名詞
附錄D 常用流式檢驗試劑的配制

近年來，流式細胞分析（flow cytometry，FCM）在檢驗醫學（laboratory medicine）中的應用逐漸增多，並迅速成為一門發展迅速的新興學科。FCM不僅可以分析各種細胞膜、細胞質和細胞核內的成分，而且還能定量分析液體（包括血清、體液和細胞培養液）中的多種可溶性物質；尤其是以單細胞為基礎的靜止與激活細胞成分與功能的分析已成為后基因組時代臨床醫學研究中不可缺少的手段之一。

流式細胞分析在現代臨床醫學中應用領域越來越廣范，檢驗項目不斷增加，對疾病的診斷與鑒別、治療方案選擇、療效觀察和預后判斷等具有重要的臨床意義。隨着FCM的快速發展，各種技術規范、標准化操作、質量保證等尚未像其他檢驗技術與方法一樣成熟，很多參考范圍也都不全或缺乏。然而，可喜的是，國內很多從事FCM應用與研究的專業人員在這方面做了很多卓有成效的工作。

成都軍區總醫院吳麗娟醫師主編的《臨床流式細胞學檢驗技術》一書的出版，相信對進一步促進FCM在臨床檢驗醫學中的應用有所裨益。作者雖然僅有5年的臨床流式細胞分析經歷，但工作非常投入和刻苦，並且關注過程和細節，以自己從事FCM的親身體會、翔實的FCM圖形和實驗數據，詮釋了FCM中的一些基本原理、通用概念、技術要點和使用技巧等，並且以概論、臨床流式細胞儀、常見影響因素、標本的采集、單細胞懸液的制備、機體造血功能監測、機體免疫功能監測、凝血功能監測、自身免疫性疾病的鑒別診斷、腫瘤臨床中的應用、白血病免疫診斷與分型、強直性脊柱炎的鑒別診斷、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症的鑒別診斷、細胞因子測定和質量控制共15章，分別按檢驗項目中的基本原理、主要試劑、主要儀器、檢驗步驟、儀器參數、注意事項、檢驗報告內容與參考范圍、臨床意義等內容作了詳盡論述；尤其是作者花費大量精力和時間完成的書中檢驗項目的大部分參考范圍數據更是十分難得。

FCM以它獨具魅力的高技術和應用前景，吸引了眾多從事臨床醫學研究與應用的學者、醫師及技術專家的關注和偏愛。我曾在很多會議或同行的討論中說過，FCM不僅是一門技術，也像一門藝術。從事FCM的工作人員不僅僅是技術專家，也應該具有藝術家的豐富想象力，這樣才能為每個試驗設計出更具特異性和靈敏度的抗體或熒光色素組合、儀器性能參數的設置方案和設門策略等。特別是在具有復雜細胞組成的標本中，要准確分析某些細胞亞群，尤其是含量很低的一些重要細胞群（如造血干細胞、微小殘留白血病細胞等），更需要根據本實驗室儀器、試劑、軟件和經驗等設計出最佳方案，並經過反復實踐，才能獲得最佳績效；相信《臨床流式細胞學檢驗技術》一書會對大家有所提示或參考。

本書特別適於初學者FCM入門的指導，並且對促進臨床流式細胞檢驗技術的規范化操作和質量保存有重要價值，也可供廣大檢驗醫學人員、臨床醫師、醫學研究人員和教師及研究生參考。

北京大學第一醫院/第一臨床醫學院檢驗科 王建中
2010年2月18日於北京